غربالگری ژن dna پلیمراز i در بین باسیلوس های گرمادوست بومی

dna پلیمراز ها از آنزیم های مهم و اساسی در حفظ، همانندسازی و انتقال اطلاعات ژنتیکی در تمام ارگانیسم ها می باشند..dna پلیمراز ها کاربرد های فراوانی در بیولوژی مولکولی، به ویژه در pcr و توالی یابی دای دی اکسی دارند. شناسایی taq polymerase انقلابی در بیولوژی مولکولی به وجود آورد. از آن پس تحقیقات در این زمینه جهش چشمگیری پیدا کرد و dna پلیمراز های مقاوم به حرارت مختلفی برای دست یابی به آنزیمی با ویژگی های مطلوب مورد مطالعه قرار گرفتند. مطالعه حاضر نیز با هدف آشکار سازی ظرفیت بالقوه و تعیین ویژگی های dna پلیمراز های مقاوم به حرارت یوباکتر های جمع آوری شده از چشمه های آب گرم اردبیل انجام گرفت. با توجه به ناشناخته بودن سویه های بومی، سویه های مورد مطالعه به روش فیلوژنی مولکولی با استفاده از توالی ژن 16s rdna تعیین هویت شدند. بررسی ها نشان دادند که سویه های مورد مطالعه به جنس geobacillus تعلق دارند. سپس با استفاده از توالی بخش های حفاظت شده این ژن در باسیلوس های گرما دوست گوناگون، پرایمر هایی برای شناسایی دامنه های مختلف این ژن در سویه های بومی طراحی گردید. آنالیز توالی ها و دامنه ها در 8 سویه مورد مطالعه نشان داد که این آنزیم به خانواده a آنزیم های dna پلیمراز تعلق دارد و دارای دامنه 5’به3’ اگزونوکلئازی و فاقد دامنه 3’به 5’ اگزونوکلئازی می باشد. در مرحله بعد عصاره سلولی این باکتری ثهیه و در واکنش pcr جایگزین taq پلیمراز گردید. نتایج نشان داد که آنزیم dna پلیمراز موجود در عصاره سلولی توانایی انجام واکنش pcr را دارد.